Eppendorf Multiporator - Handbuch (Seite 19)

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– Die Mikro-Fusionskammer mit dem Koaxialanschluss des Kabels
verbinden.
– Elektroden und Zellen unter dem Mikroskop fokussieren.
– Die eingestellten Parameter (siehe Kap. 5.3) über die Taste START
unter mikroskopischer Betrachtung ablaufen lassen.
Abb.6: Mikroskopische Aufnahme der Zellen während des Alignments und nach
dem Fusionsablauf mit einzelnen Fusionsprodukten
Die als optimal ermittelten Parameter können direkt für die Fusion in der
Helix-Fusionskammer übernommen werden (siehe Kap. 4.8.4).
4.8.2 Mikro-Fusionskammer (0,5 mm Elektrodenabstand)
Im nichtserienmäßigen Zubehör (siehe Bestellinformationen) ist eine
Mikro-Fusionskammer mit einem veränderten Elektrodenabstand von
500 µm verfügbar. Mit Hilfe dieser Mikro-Fusionskammer können Zellen
unter mikroskopischer Kontrolle fusioniert werden.
Allgemeine Hinweise zur Verwendung einer Mikro-Fusionskammer sind
im Kapitel 4.8.1 und in der Basis-Applikations-Anleitung Elekrofusion auf-
geführt, welche im Lieferumfang des Fusionsmoduls enthalten ist.
Wichtiger Hinweis: Bei der Berechnung der Fusionsparameter (siehe
Basis-Applikations-Anleitung Elektrofusion) muss der veränderte Elektro-
denabstand von 500 µm berücksichtigt werden. Bitte beachten Sie, dass
die als optimal ermittelten Parameter
nicht direkt für die Fusion in der
Helix-Fusionskammer übernommen werden können.
4.8.3 Reinigung der Mikro-Fusionskammer
Der Inhalt der Mikro-Fusionskammer wird mit Aqua bidest. ausgespült
(Spritzflasche), hartnäckige Zellreste können mit einer weichen Zahn-
bürste vorsichtig in Längsrichtung der Elektroden entfernt werden (Der
Elektrodenabstand darf nicht verändert werden!). Ein Nachspülen mit
Ethanol (70 %, unvergällt) beschleunigt den Trocknungsprozess.
200 µm
Ausrichtung der Zellen
zwischen den Elektroden
(Alignment) Zellen nach der Fusion und Fusionsprodukte
4 Gerätebeschreibung
Multiporator_Text_de.fm Seite 19 Freitag, 9. Juni 2006 8:03 08