Eppendorf AF2200 Plate Reader - Handbuch (Seite 43)

Bedienung
Eppendorf ® PlateReader AF2200
Deutsch (DE)
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6.4.5 MRW-Größe
Die MRW-Größe bestimmt die Anzahl der in einem Well zu messenden Punkte. Je nach
Mikrotestplatten-Typ ist für die Größe ein Bereich von 1 x 1 bis maximal 15 x 15 Punkten wählbar. Der
Durchmesser der einzelnen Messpunkte entspricht dem theoretisch berechneten Durchmesser des
Lichtstrahls im Fokus (siehe Tabelle).
Der in der Software angezeigte MRW-Typ stellt deswegen nur eine schematische Übersicht des
Messmusters dar. Beim Messen echter Proben kann das Muster variieren und die Überlappung der
einzelnen Messpunkte kann leicht vom angezeigten Muster abweichen. Es ist daher zu empfehlen, die
Parameter für mehrere Messungen pro Well für jede neue Anwendung zu optimieren.
6.4.6 MRW-Grenze
Zusätzlich zu Größe und Typ ermöglicht eine Grenzfunktion dem Anwender, einen gewissen Abstand
zwischen dem Lichtstrahl und der Wand des Wells auszuwählen (Abstand in μm). Wie bereits erwähnt,
stellt die Software nur eine schematische Übersicht des Messmusters dar. Die Grenze wird aus dem
theoretischen Strahldurchmesser des Geräts berechnet. Beim Messen von flüssigen Proben wird der
Durchmesser des Lichtstrahls jedoch durch Art und Menge der Flüssigkeit im Well beeinflusst.
Darüber hinaus beeinflusst auch der Plattentyp (z. B. Material des Bodens der Mikrotestplatte) die
Eigenschaften des Lichtstrahls. Aus diesem Grund entspricht die in der Software angezeigte theoretische
Grenze beim Messen einer echten Probe möglicherweise nicht der tatsächlichen Grenze. Es ist daher sehr
zu empfehlen, die Parameter für mehrere Messungen pro Well für jede neue Anwendung zu optimieren.
Vergewissern Sie sich, dass durch die ausgewählte Grenze ein ausreichender Abstand zwischen dem
Lichtstrahl und der Wand des Wells gewährleistet ist.
Messmodus
Fluoreszenzintensität oben 2 mm
Fluoreszenzintensität unten 2 mm
Extinktion (Mikrotestplatten-Optik) 0,5 mm
In der Software wird nur eine schematische Übersicht des Messmusters angezeigt.
Optimieren Sie daher die Parameter für mehrere Messungen pro Well für jede neue
Anwendung. Vergewissern Sie sich, dass die ausgewählte Grenze ausreicht, um eine
Überlappung zwischen dem Lichtstrahl und der Wand der Mikrotestplatte zu vermeiden.
Ein zu geringer Wert für die Grenze kann aufgrund von Überlappungen zwischen dem
Lichtstrahl und der Well-Wand zu falschen Messergebnissen führen.