Eppendorf Multiporator - Electroporation - Handbuch (Seite 24)

24
Tabelle 3
Die von Eppendorf angebotenen Elektroporationspuffer werden auf die folgenden wichtigen Qualitätskriterien hin über-
prüft:
• Leitfähigkeit
• pH-Wert
• Osmolarität
• Sterilität
• Mycoplasmen
• Endotoxine
• Pyrogene
• Zytotoxizität
* Die Reinheit von myo-Inositol kann chargenweise unterschiedlich sein. Es soll so rein sein, dass bei einem Wert von
280 mOsmol/kg in aqua bidest. eine Leitfähigkeit von 10 µS/cm nicht überschritten wird. Die Leitfähigkeit einzelner
Chargen
sollte vor der Pufferherstellung gemessen werden.
Gewünschte Osmolarität ml hypoosmolarer Puffer (ml) ml isoosmolarer Puffer
90 mOsmol/kg 10 0
150 mOsmol/kg 6.8 3.2
200 mOsmol/kg 4.2 5.8
250 mOsmol/kg 1.6 8.4
280 mOsmol/kg 0 10
Poration (hypoosmolar) Poration (isoosmolar)
Wasser (aqua bidest steril) Auffüllen auf 1000 ml Auffüllen auf 1000 ml
KCl 25 mM 25 mM
KH
2
PO
4
0,3 mM 0,3 mM
K
2
HPO
4
0,85 mM 0,85 mM
myo-Inositol * ad 90 mOsmol/kg ad 280 mOsmol/kg
pH-Wert 7,2 ± 0,1 7,2 ± 0,1
Leitfähigkeit bei 25 °C 3,5 mS/cm ± 10 % 3,5 mS/cm ± 10 %
7.2 Volumina des Hypo- und Isoosmolaren Puffers zur Einstellung der gewünschten Osmolarität (10 ml)
7.3 Zusammensetzung der Puffer für die Elektroporation
7 Anhang
7 Anhang
Multipor_Appli_E_poration_de.fm Seite 24 Montag, 30. Januar 2006 2:16 14